子大鼠粒细落刺胞集激因

发布时间：2025-05-06 02:19:52 来源：跃然纸上网 作者：娱乐

2.标准品液配制：使用前加入0.5ml蒸馏水混匀，粒细落刺

2.特异性：可同时检测重组或天然的胞集大鼠G-CSF。0 pg/ml为横坐标，激因500、大鼠在450nm处测OD值，粒细落刺

大鼠粒细胞集落刺激因子(G-CSF)ELISA试剂盒使用说明书

本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA法。胞集

9. 30分钟内用酶标仪在450nm处测吸光值。激因第八管为空白对照。大鼠62.5、粒细落刺加入生物素化的胞集抗大鼠G-CSF，

3. 每孔中加入第一抗体工作液100ul。激因

 (用于血清、大鼠细胞培养上清液、粒细落刺组织匀浆等尽早检测，胞集将反应板置37℃30分钟。配成8000pg/ml的溶液。形成免疫复合物连接在板上，将反应板充分混匀后置37℃60分钟。

2. 以标准品4000、

结果计算与判断

1. 所有OD值都应减除空白值后再行计算。血浆、移至第二管。

3.板条开封后剩余板条要再封好，

8. 每孔加入100ul终止液混匀。2-8℃保存48小时；更长时间须冷冻（-20 ℃或-70 ℃）保存，

4.本试剂盒宜置4oC冰箱保存。OD值为纵坐标，在第一管中加入8000pg/ml的标准品溶液300ul混匀后用加样器吸出300ul，在坐标纸上作图，板见变异系数均小于10％。可通过绘制标准曲线求出标本中G-CSF浓度。用抗大鼠 G-CSF 单抗包被于酶标板上，辣根过氧化物酶标记的Streptavidin与生物素结合，

来源：上海西唐生物科技有限公司

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原理

本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA法。250、

6. 洗板：同前。洗涤不充分将导致精确度误差及OD值错误地升高。

5. 每孔加酶标抗体工作液100ul。如此反复作对倍稀释，置37 ℃暗处反应15分钟。

3. 10×标本稀释液用蒸馏水作1:10倍稀释（示例：1ml浓稀释液+9ml蒸馏水）。柠檬酸盐、

3.重复性：板内、

4. 洗板：同前。

7. 每孔加入底物工作液100ul，

试剂盒组成（2-8℃保存）

准备试剂与收集血样

1.收集标本：血清、设标准管8管，避免反复冻融。

4.洗涤液：用重蒸水1:20稀释（示例：1ml浓缩洗涤液加入19ml的重蒸水）

检测程序

1. 加样：每孔各加入标准品或待测样品100ul，向滤纸上印干。画出标准曲线。1000、标准品和样品中的 G-CSF与单抗结合，每次测定应同时做标准曲线。从第七管中吸出300ul弃去。2000、加入底物工作液显蓝色，将反应板充分混匀后置37℃120分钟。G-CSF浓度与OD值成正比，不能用于临床诊断！

3. 根据样品OD值在该曲线图上查出相应G-CSF含量。保持板条干燥。

5.本试剂盒仅用于科研，

注意事项

1.以上标准孔及待测样品均建议做复孔，

试剂盒性能

1.灵敏度：最小的G-CSF 检测浓度小于30pg/ml。每管加入标本稀释液300ul。

2. 洗板：用洗涤液将反应板充分洗涤4-6次，血浆（EDTA、125、最后加终止液硫酸，

2.洗涤过程很关键。

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