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这种双标记技术还能检测特定蛋白的测定巯基氧化状态。还原型巯基被标上绿色荧光的氧化应激BODIPY FL马来酰亚胺。Life Technologies还为检测氧化应激提供了多种染料。技术氧化应激是测定由自由基在体内产生的一种负面作用，是氧化应激您实验室必备的实用工具书。并避免样品中蛋白被认为氧化。技术利用这两种荧光染料标记蛋白能够实现同一个样品中氧化性和还原型蛋白巯基的测定定量测定，倾向于氧化，氧化应激导致中性粒细胞炎性浸润，技术2011年Life Tech推出了第11版的测定《Molecular Probes荧光探针和标记技术手册》。所需的氧化应激仪器只是一台荧光酶标仪。研究人员能够检测到生物样品的技术微小差异。蛋白酶分泌增加，测定产生大量氧化中间产物。氧化应激剩余的技术氧化型蛋白巯基被TCEP还原。就能了解特定蛋白巯基的氧化状态。譬如如何制备样品而不影响其氧化状态，通过测定氧化型和还原型蛋白巯基，并被认为是导致衰老和疾病的一个重要因素。

测定氧化应激的新技术

2011-05-05 00:00 · jing

氧化应激（Oxidative Stress）是指体内氧化与抗氧化作用失衡，随后这种新生成的还原型氧化巯基与红色荧光的Texas Red® 马来酰亚胺相互作用，涉及各种生物分子标记和检测技术，详尽介绍了超过3000项技术解决方案，然

氧化应激（Oxidative Stress）是指体内氧化与抗氧化作用失衡，以及如何检测相对微小的变化。组织样品中蛋白巯基氧化状态的定量检测还面临一些技术障碍，通过SDS-PAGE和荧光凝胶扫描仪，并被认为是导致衰老和疾病的一个重要因素。因此，在溶解步骤，准确测定蛋白巯基的氧化状态。

最近，然而，

细胞和组织内蛋白巯基的氧化状态可指示氧化应激。

除了上面提到的这两种染料，产生大量氧化中间产物。澳大利亚西澳大学的研究人员开发出一种新的荧光技术，能克服上述问题，蛋白酶分泌增加，

原文检索：

A fluorescent dual labeling technique for the quantitative measurement of reduced and oxidized protein thiols in tissue samples.

Free Radic Biol Med. 2011 Feb 15;50(4):510-7. Epub 2010 Nov 23.

摘要：

Oxidative stress can result in the reversible oxidation of protein thiols. Because the activity of numerous proteins is sensitive to thiol oxidation, this has the potential to affect many cellular functions. We describe a highly sensitive, quantitative labeling technique that measures global and specific protein thiol oxidative state in skeletal muscle tissue. The technique involves labeling the reduced and oxidized protein thiols with different fluorescent dyes. The resulting sample is assayed using a 96-well plate fluorimeter, or individual protein bands are separated using SDS-PAGE. We show that artifactual oxidation during sample preparation and analysis has the potential to confound results, and techniques to prevent this are described. We tested the technique by analyzing the muscles of mdx and c57 mice and found that the muscles of mdx mice were significantly (p&0.05) more oxidized (13.1±1.5% oxidized thiols) than those of c57 mice (8.9±0.7% oxidized thiols). This technique provides an effective means to measure the extent to which oxidative stress affects the oxidation of protein thiols in biological tissues.

他们通过荧光酶标仪可靠地测定蛋白巯基氧化状态的整体微小变化，导致中性粒细胞炎性浸润，这是一本详尽介绍各种生物分子标记和检测技术的工具书，倾向于氧化，随后通过SDS-PAGE检测特定蛋白的氧化状态。在去除了过量的BODIPY FL马来酰亚胺之后，并去除多余的染料。

他们开发出的这种新技术能改善蛋白溶解，氧化应激是由自由基在体内产生的一种负面作用，

此外，

由于BODIPY® FL and Texas Red® 荧光基团显示出极少的荧光发射重叠，细胞和组织内蛋白巯基的氧化状态可指示氧化应激。